液相色谱仪仪器操作与维护

1. 仪器设备

仪器设备：GX液相色谱仪，配备二极管阵列（PDA）、荧光检测器，岛津LC-20AT。

2. 适用范围

适用于有紫外或荧光吸收的有机化合物的分离与定量分析。主要用于水、空气和废气、土壤、固体废物、生物体等样品中多环芳烃类化合物的测定。

3. 操作步骤

3.1 检查：开机前检查流动相种类、液位是否满足要求，色谱柱是否匹配，系统管路连接是否到位。流动相在使用之前一定要经过0.45μm的膜过滤，并且作超声脱气处理。注意洗针溶剂是否足够，并检查废液瓶液位。

3.2 开机：依次打开泵A、泵B、主机、柱温箱、检测器的电源。将泵A与泵B的排液阀逆时针旋转180°松开，分别按下面板上的pump按钮，数秒钟后两泵各自启动开始排气泡，此过程需要数分钟时间。结束后两泵自行停止。然后顺时针旋转180°将排液阀拧紧。待主机自检结束后，点击电脑桌面上的Lcsolution快捷方式，选择合适的联机配置进入工作站。从File→Open Method File→选择合适的方法→Open，然后在仪器参数界面点击Download。若此时泵没有反应，点击工具栏中System On/Off按钮即可。

3.3 平衡色谱柱：用方法给定的初始流动相平衡色谱柱，平衡时间至少为流过10倍柱体积所需的时间，待基线平稳后才可进样。

3.4 编辑序列：从主界面左侧工具栏中点击Batch Processing→Batch Wizard进入序列编辑向导，按步骤编辑合适的样品类型、样品数、样品名、文件名，点击完成，结束序列编辑。

3.5 样品分析：将经过预处理的样品经0.45μm的膜过滤后装入进样小瓶中，置于样品盘上与序列相对应的位置。

3.6关机：样品分析结束后，用纯有机溶剂冲洗色谱柱，冲洗时间至少为流过10倍柱体积所需的时间。实际所需时间可能更长，待基线平稳即可。在仪器状态栏将流量逐渐调小至0，退出工作站，依次关闭检测器、柱温箱、泵和主机的电源。

3.7 记录。

4. 日常维护

保持仪器安装房间环境整洁、通风良好，环境条件适宜，检查仪器接地良好。经常清理仪器内外灰尘，若长时间不用，建议每月至少用甲醇或乙腈等溶剂彻底清洗系统流路一次，并且检查系统的完好情况。

5. 运行检查

检查样品溶液中待测组分的分离和响应是否正常，基线和噪声的变化是否在合理的范围内，及时关注柱前压的变化情况。

6. 计量检定

每年进行一次计量检定，检定合格后应及时更新检定标识，填写记录。

7. 期间核查

7.1 核查频次：在两次检定之间，每半年进行一次仪器期间核查。如果仪器在使用中出现异常或在维修后，增加期间核查的频次。

7.2 核查内容：精密度核查，使用苯并[a]芘标准溶液重复6次分析，响应值RSD≤5%为合格。

8. 注意事项

8.1 流动相、待测样品等所有进入分析系统的液体必须经过0.45μm的滤膜过滤，去除颗粒物，防止堵塞色谱分离柱，致使柱前压力增高，损坏高压泵。

8.2 待测样品溶液应该在前处理的过程中尽量去除干扰物质，进样前应转换成流动相溶剂体系或用流动相定容，再经0.45μm的滤膜过滤后方可进样。

8.3 流动相的pH值一般情况下不能高于9或小于2，否则易损坏色谱柱。

8.4 若使用盐度较高的缓冲溶液体系为流动相，样品分析结束后应换成低有机相比例的流动相，如含5%甲醇或乙腈的水相流动相反复冲洗系统，防止在进样阀、柱塞杆、色谱柱等处有盐析出，对系统造成损坏。ZUI后逐渐过渡到纯有机相流动相冲洗系统，以保护色谱柱。

8.5 如柱压升高明显、或在色谱柱平衡足够长的时间后仍发现组分的保留时间有严重漂移，首先考虑可能是预柱受到了沾污，可将预柱反接，用甲醇或乙腈冲洗；若冲洗后还是不能解决问题，建议更换预柱。

8.6 如8.5无法解决问题，需检查色谱柱，拆开柱头部分，检查柱头填料是否塌陷、是否变色、筛板是否堵塞，轻轻刮除1-2mm填料，超声清洗筛板，再紧压补上同类填料，压紧筛板拧紧柱头，接回色谱系统，用甲醇或乙腈流动相冲洗，如仍无法改善建议更换色谱柱。

8.7流动相应经负压抽滤或超声去除气泡，使用较长时间应经常观察流动相液位，防止气泡进入系统。

8.8分析过高浓度样品后应注意后续样品浓度值的可信度，必要时增加平行样或空白样测定，防止系统残留带来准确度干扰；每次分析完样品后必须做空白样，用流动相清洗管路和色谱柱30min后再关机。